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说一说核酸检测结果假阳性的原因

原创 重庆科普作家协会 2022-11-23 作者:邹静波 审核专家:罗阳

最近,随着疫情的反复,大家又开始了严格的核酸检测。然而在核酸检测中,有时候会出现检测结果假阳性的情况,这是由于什么原因造成的呢?



原因一:试剂污染

这种情况很罕见,通常试剂厂家在试剂出厂时都要经过严格的内部质检程序,所以我们仅从理论上讨论出现试剂污染的可能性。试剂污染发生在厂家生产时,阳性对照或质控品对试剂的污染,即为试剂盒本身污染,可通过更换同一品牌不同引物的其他批号,或采用其它品牌试剂检测即可规避。因此,有经验的实验室一般都会定期更换试剂品种,以避免出现上述现象。

另外一种情况是反应体系配制时的污染,通常发生在配制试剂时出现的触摸污染,或在试剂配制单元加入高浓度的试剂盒内阳性对照引起。通常可通过重新配制反应体系或使用F0级低浓度外部质控品来替换试剂盒内阳性对照品来解决,但F0级新冠病毒阳性质控品有噬菌体假病毒颗粒和慢病毒载体等多种方式制成,适用于所有商品化试剂盒,一旦出现污染,所有试剂均会受到影响,因此与试剂盒本身自带的阳性对照一旦污染会因上下游引物不同,只会影响相同品牌在未修改引物前提下所有批号的试剂相比,各有优缺点。

原因二:采集污染

这种情况多与标本采集者近期携带了采样管、采样拭子进入omicron感染者所处特定的相对密闭空间,或与疫苗接种在同一区域相关,或刚刚接种疫苗后进行核酸检测有关。采样后将剩余采样套装置于空旷无遮挡的风浴场所长时间用洁净空气吹风,以降低外表面粘附的病毒颗粒数量,或者更换区域,严格按照核酸检测要求时限进行核酸检测,可以有效避免此类假阳性情况出现。

原因三:非特异性扩增

当PCR8联管盖未盖严,会出现反应体系液受热蒸发,导致出现非特异性扩增,造成误判为假阳性,通过经过复核就能发现,轻松解决。

原因四:样本溢洒

实际工作过程中,可能会因管帽关闭不严导致标本溢洒。一旦溢洒的为阳性标本,就会造成其他标本假阳性的几率倍增。解决此类污染,要求标本采集、运送人员规范操作,盖盖严密,平稳运送,直立放置。

原因五:标本性状影响

粘稠标本,因其对于磁株的粘附作用,会造成新冠核酸检测结果,尤其是快速核酸检测结果出现误差,假阳/假阴均有可能。解决此问题,可静置标本后,再行检测。

原因六:试剂污染

因新冠核酸检测标本量较大,且持续长时间重复性加样,工作中容易发生错孔加样,若错孔的正好是阳性标本,或者因员工操作技术不熟练,加样时喷溅、枪头残留滴溅等造成孔间污染,也会产生假阳性结果。解决此类污染,需要间隙性更换操作者,避免过度疲劳操作,加强员工培训,保证足量休息,保证规范操作。必要时在同一双人安全柜使用两人小组,一个负责开关盖,一个负责加样,双重保险,既可提高效率,又可减少差错发生。


原因七:实验室空气污染

这种污染是所有PCR检测中最令人担心的污染形式,一旦发生,因残余核酸片段不易清除,故对于核酸检测而言,几乎是毁灭性的。解决的办法是定期更换试剂盒品牌,在不能更换工作环境时,通过佛系降解扩增产物,减小污染影响,使用核酸清除剂和通过较长时间的通风和紫外线照射,通过人为更换环境空气,降低气溶胶中扩增产物浓度,通常情况下45天后基本可消除污染对实验的影响。


原因八:耗材污染

PCR核酸检测使用耗材较多,包括手套、枪头、八联排管、鞋套、靴套、帽子、隔离服或防护服等。若耗材上残留或污染核酸或片段,也容易造成假阳性结果的出现。解决此问题,需要保证实验室不同区域规范着装,人员流动注意及时更换着装,使用带滤芯的枪头,库房远离实验室,操作动作规模,减少触摸污染。

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